SuperScript™ IV 反轉(zhuǎn)錄酶

SuperScript™ IV 反轉(zhuǎn)錄酶

SuperScript™ IV 反轉(zhuǎn)錄酶 (RT) 是一種專有 MMLV 突變體，在 RT 反應(yīng)中具有出色的穩(wěn)健性和可靠性。SuperScript™ III 在抑制劑耐受性、合成性和反應(yīng)速度等方面得到了很大提高，同時(shí)保留了前代酶的所有優(yōu)點(diǎn)，包括較高的熱穩(wěn)定性、高效全長 cDNA 合成以及較低的 RNA 酶活性。SuperScript™ IV Rt 旨在在存在抑制劑下提供可靠、一致且快速的 cDNA 合成，前述抑制劑在很多樣品中均存在且會(huì)導(dǎo)致其他當(dāng)前可用的 RT 效率低下。

SuperScript™ IV RT 是 SuperScript™ 產(chǎn)品系列中所有 RT-PCR 和 qRT-PCR 應(yīng)用。尤其是當(dāng)重現(xiàn)性和可靠性成為主要考慮事項(xiàng)，以及 RNA 樣品中的抑制劑可能干擾 cDNA 合成，進(jìn)而導(dǎo)致基因表達(dá)研究出現(xiàn)偏倚時(shí)，我們推薦使用這款產(chǎn)品。

SuperScript™ IV 反轉(zhuǎn)錄酶的功能包括：

•顯著提高了對多種可能干擾 cDNA 合成的抑制劑的耐受性

• 可對多種樣品進(jìn)行穩(wěn)健且具有特異性的 cDNA 合成

•較快的反轉(zhuǎn)錄酶反應(yīng)，可將孵育時(shí)間從 >50 分鐘縮短至 10 分鐘

•與 SuperScript™ III RT 相比，持續(xù)合成能力顯著提高

來源

從表達(dá) M-MLV pol 基因的大腸桿菌中純化，經(jīng)修飾可提高熱穩(wěn)定性和半衰期、持續(xù)合成能力、抑制劑耐受性并降低 RNase H 活性。

性能和質(zhì)量檢測

脫氧核糖核酸內(nèi)切酶、脫氧核糖核酸外切酶及核糖核酸酶檢測；cDNA 產(chǎn)物的得率和長度。

單位定義

一單位的 SuperScript™ IV RT 是指在 37°C 下使用 poly(A) oligo(dT)12-18 作為模板/引物，將 1 納摩爾脫氧核糖核酸在 10 min 內(nèi)摻入酸可沉淀材料所需要的酶量。

單位反應(yīng)條件

50 mM Tris-HCl（pH 值 8.3）、4 mM MgCl2、10 mM DTT、50 mM KCl、0.5 mM dTTP、0.4 MBq/mL [3H]-dTTP、0.4 mM poly(A) oligo (dT)12-18 和酶，20 μL，37°C 下 10 min。