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基質(zhì)膠的正確使用指南
  • 發(fā)布日期:2026-04-15      瀏覽次數(shù):307
    • 基質(zhì)膠是從EHS小鼠腫瘤中提取的基底膜基質(zhì),能在室溫下快速聚合,形成模擬體內(nèi)細(xì)胞基底膜的三維支架,給細(xì)胞提供“安家"的環(huán)境。

       核心作用:幫細(xì)胞附著、生長、分化,讓體外培養(yǎng)的細(xì)胞更接近體內(nèi)真實(shí)狀態(tài),解決二維培養(yǎng)細(xì)胞失活、實(shí)驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)的問題。

      常見類型:

      1、標(biāo)準(zhǔn)型(含/不含酚紅):適合常規(guī)2D、3D細(xì)胞培養(yǎng)、血管生成、細(xì)胞侵襲等基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn),不含酚紅款適配熒光檢測。

      2、低生長因子型(GFR):適合對基質(zhì)成分要求嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn),如細(xì)胞信號通路研究、類器官培養(yǎng),減少背景干擾。

      3、高濃度型:蛋白濃度高,剛度強(qiáng),適合體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn)、血管生成研究。

      4、專用型:干細(xì)胞用、類器官用,針對性適配特殊細(xì)胞培養(yǎng)需求。

      基質(zhì)膠的正確操作步驟:

      1、解凍:將基質(zhì)膠置于冰中,4℃冰箱避光過夜融化(蛋白濃度高時需延長時間),切勿放冰箱門或頻繁開啟的區(qū)域。

      2、分裝:解凍后渦旋混勻,用預(yù)冷移液管按單次用量分裝,立即置于-20℃以下避光保存,避免反復(fù)凍融。

      3、稀釋:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求稀釋基質(zhì)膠(茹成管實(shí)驗(yàn)稀釋至6-8mg/ml),全程冰浴操作。

      4、鋪膠:培養(yǎng)板置于冰上,按50μl/cm2的量加入基質(zhì)膠,均勻鋪展。

      5、孵育:37℃培養(yǎng)箱中孵育30分鐘,待基質(zhì)膠凝固后即可接種細(xì)胞。 

      基質(zhì)膠使用注意事項(xiàng):  

      保存與運(yùn)輸注意事項(xiàng):

      1、保存溫度:-20℃或以下避光保存,有效期兩年,不可存放于無霜冰箱(自動除霜影響溫度)·

      2、運(yùn)輸要求:運(yùn)輸要求:干冰運(yùn)輸,到貨后若無干冰且基質(zhì)膠呈凝膠狀,及時聯(lián)系商家。

      3、 解凍后保存:4℃避光可保持30天左右液態(tài),建議盡快分裝或使用。

      操作過程注意事項(xiàng):

      1、全程低溫:所有接觸基質(zhì)膠的耗材、試劑均需4℃預(yù)冷,操作全程冰浴,避免體溫導(dǎo)致提前凝固。

      2、無菌操作:解凍后在無菌區(qū)域操作,瓶身噴灑70%乙醇消毒風(fēng)干,避免污染。

      3、用量控制:根據(jù)瓶身標(biāo)示的蛋白濃度(批次有差異),優(yōu)化用量以保證實(shí)驗(yàn)一致性。

      4、顏色變化:凍融過程中可能出現(xiàn)顏色變化,屬正?,F(xiàn)象,不影響使用。


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