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01 為什么要進(jìn)行細(xì)胞體外培養(yǎng)

社會(huì)上習(xí)慣于把科學(xué)和技術(shù)連在一起，統(tǒng)稱(chēng)為科學(xué)技術(shù)，簡(jiǎn)稱(chēng)科技。科學(xué)解決理論問(wèn)題，技術(shù)解決實(shí)際問(wèn)題。我們走向更好的生活現(xiàn)代生物技術(shù)一般認(rèn)為包括基因工程技術(shù)、細(xì)胞工程技術(shù)、酶工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù)，而這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細(xì)胞培養(yǎng)有密切關(guān)系。醫(yī)藥領(lǐng)域（基因工程藥物或疫苗在研究生產(chǎn)過(guò)程中很多是通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)實(shí)現(xiàn)）、基因工程（乙肝疫苗很多是以 CHO 細(xì)胞作為載體）、細(xì)胞工程（雜交瘤單克隆抗體，是通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)實(shí)現(xiàn)），既使是現(xiàn)在飛速發(fā)展的基因工程抗體也離不開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)；正在倍受重視的基因治療、體細(xì)胞治療也要經(jīng)過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程才能實(shí)現(xiàn)，發(fā)酵工程和酶工程有的也與細(xì)胞培養(yǎng)密切相關(guān)。

總之,細(xì)胞培養(yǎng)在整個(gè)生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展中起到了很關(guān)鍵的核心作用。

02 細(xì)胞培養(yǎng)基本概念

細(xì)胞培養(yǎng)
將活細(xì)胞（尤其是分散的細(xì)胞）在體外進(jìn)行培養(yǎng)的方法稱(chēng)為細(xì)胞體外培養(yǎng)。狹義的主要是指分離（散）細(xì)胞培養(yǎng)，廣義的還包括單（個(gè)）細(xì)胞培養(yǎng)又稱(chēng)克隆，是指單個(gè)細(xì)胞通過(guò)有絲分裂形成的細(xì)胞群體。

原代細(xì)胞
初次培養(yǎng)。即培養(yǎng)物一經(jīng)接種到培養(yǎng)皿中就不再分割，任其生長(zhǎng)繁殖而不更換生長(zhǎng)器皿。
 傳代培養(yǎng)
隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)、細(xì)胞不斷分裂繁殖，細(xì)胞之間相互接觸會(huì)發(fā)生接觸性抑制，生長(zhǎng)速度逐漸減慢甚至停止。培養(yǎng)皿中營(yíng)養(yǎng)物逐漸不足，代謝產(chǎn)物不斷累積，不利于細(xì)胞繼續(xù)生長(zhǎng)。在這種情況下，需要將培養(yǎng)物分割成小的部分，重新接到培養(yǎng)器皿中進(jìn)行再培養(yǎng)。
 細(xì)胞系
原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代培養(yǎng)后所繁殖的細(xì)胞群體。狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義的是指可傳代的細(xì)胞。正常細(xì)胞通常只能分裂有限的次數(shù)，隨后就會(huì)喪失增殖的能力，這是一個(gè)由遺傳決定的事件，被稱(chēng)為衰老。這種細(xì)胞系被稱(chēng)為有限細(xì)胞系；一些細(xì)胞系會(huì)通過(guò)轉(zhuǎn)化的過(guò)程變?yōu)橛郎约?xì)胞系，這一過(guò)程可自然發(fā)生，也可經(jīng)化學(xué)或病毒誘導(dǎo)發(fā)生。有限細(xì)胞系發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得無(wú)限分裂能力后就成為連續(xù)細(xì)胞系。
 

03 細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的主要要求是時(shí)時(shí)維持細(xì)胞培養(yǎng)工作區(qū)域處于無(wú)菌狀態(tài)，獲得無(wú)菌條件經(jīng)濟(jì)的方式就是使用細(xì)胞培養(yǎng)超凈臺(tái)。細(xì)胞培養(yǎng)超凈臺(tái)應(yīng)足夠一人使用，內(nèi)外部均采用易清潔設(shè)計(jì)，具有充足的照明，使用舒適。使用過(guò)程中需保持細(xì)胞培養(yǎng)超凈臺(tái)內(nèi)工作空間整潔有序，將所有物品放在直視范圍內(nèi)，便于取用。使用前向放入細(xì)胞培養(yǎng)超凈臺(tái)內(nèi)的物品噴灑70%的乙醇，擦拭清潔，進(jìn)行消毒。

細(xì)胞培養(yǎng)通超凈臺(tái)的物品擺放一般遵循以下右手使用習(xí)慣，可根據(jù)特殊實(shí)驗(yàn)中增加的物品進(jìn)行相應(yīng)的適當(dāng)改動(dòng)。